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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠小氣道平滑肌細胞

英文名稱：Mouse Small Airway Smooth Muscle Cells

組織來源：小氣道

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

小鼠小氣道平滑肌分離自小氣道組織；臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細支氣管稱為小氣道。小氣道具有氣流阻力小，但易阻塞的特點。在平靜吸氣時，空氣進入狹窄的鼻咽部，產(chǎn)生渦流。由于小氣道已無軟骨支持，在脫離纖維鞘嵌入肺組織后，管腔通暢性不象軟骨性氣道，易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層，作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處，這些細胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應、產(chǎn)生化學因子進行宿主防御、表達粘附分子，并可能通過HLA-DR表達呈遞抗原；它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病，如哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化，都涉及呼吸道表面上皮細胞的破壞；小氣道上皮細胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。小氣道的生理功能特點：①小氣道阻力?。虎跉饬魉俣嚷?；③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例。小氣管平滑肌細胞主要功能：①保持氣道張力維持小氣道形態(tài)；②肺小氣道進行氣體交換，病變可引起換氣功能障礙；③炎癥、痰液阻塞或當氣道外壓大于氣道內(nèi)壓時容易造成小氣道閉合、萎陷。小氣管平滑肌細胞與主要病生理變化：①支氣管炎；②肺氣腫；③慢性阻塞性肺疾病。

實驗室分離的小鼠小氣道平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的小鼠小氣道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基：基礎培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳2-3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠小氣道平滑肌體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠接觸蛋白3(CN3)檢測試劑盒 ，英文名： CN3 ELISA Kit

Mouse neuophil gelatinase associated lipocalin (NGAL) ELISA Kit 小鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)檢測試劑盒

RatThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 大鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit魚骨鈣素/骨谷蛋白

細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP1/8/13)原位明膠酶譜法(insituzymography)熒光染色試劑盒20次

RatOsteoprotegerin,OPGELISAKit大鼠骨保護素(OPG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD86重組食蟹猴 CD86 / B7-2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

LH(Luteinizing Hormone 0.5mgLH(Luteinizing Hormone) 人促黃體生成素(多肽)

PHPT1重組人 PHPT1 / PHP14 蛋白 Protein

DNAJC30 Protein Human 重組人 DNAJC30 蛋白

NLGN1 Protein Mouse 重組小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 蛋白

LH(Luteinizing Hormone 0.5mgLH(Luteinizing Hormone) 人促黃體生成素(多肽)

DNAJC30 Protein Human 重組人 DNAJC30 蛋白

CD86重組食蟹猴 CD86 / B7-2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

NLGN1 Protein Mouse 重組小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 蛋白

PHPT1重組人 PHPT1 / PHP14 蛋白 Protein

小鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human chemokine (FK) ELISA Kit 人趨化因子(FK)檢測試劑盒

HumanSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIgELISAKit 人細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanalveolibasememembranezoneaibody,ABM-Ab檢測試劑盒人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物超氧化物陰離子熒光法定量檢測試劑盒20次

MonkeyIerleukin4,IL-4ELISAKit猴白介素4(IL-4)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠小氣道平滑肌細胞小鼠核因子kb（NF-kb）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠漢坦病毒（HV）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用