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產(chǎn)品名稱:人宮頸癌成纖維細胞

產(chǎn)品特點:人宮頸癌成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞) VNN2 Others Human 人 VNN2 / Vanin-2 人細胞裂解液 人腎系膜細胞RNAHRMC miRNA5 μg KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細胞 肝癌細胞,HCC-9204細胞 NCI-H292(肺癌細胞

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-12-11

訪問次數(shù):36

人宮頸癌成纖維細胞的詳細資料:

人宮頸癌成纖維細胞

實驗報告:

人宮頸癌成纖維細胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞簡介:

人宮頸癌成纖維細胞

人宮頸癌組織源成纖維分離自患有宮頸癌病人的宮頸癌組織;宮頸癌也稱子宮頸癌,指發(fā)生在子宮陰道部及宮頸管的惡性腫瘤,是女性常見惡性腫瘤之一,發(fā)病率位于女性腫瘤的位。宮頸癌可向鄰近組織和器官直接蔓延,向下至陰道穹窿及陰道壁,向上可侵犯子宮體,向兩側(cè)可侵犯盆腔組織,向前可侵犯膀胱,向后可侵犯直腸。也可通過淋巴管轉(zhuǎn)移至宮頸旁、髂內(nèi)、髂外、腹股溝淋巴結(jié),晚期甚至可轉(zhuǎn)移到鎖骨上及全身其他淋巴結(jié)。血行轉(zhuǎn)移比較少見,常見的轉(zhuǎn)移部位是肺、肝及骨。腫瘤微環(huán)境即腫瘤細胞生存的外部環(huán)境,由不同種類的非腫瘤性的細胞與細胞外基質(zhì)(Extracellular matrix,ECM)構(gòu)成,包括纖維細胞,免疫細胞,內(nèi)皮細胞,間充質(zhì)干細胞等,腫瘤細胞通過調(diào)控這些間質(zhì)細胞,創(chuàng)造出有利于自身侵襲轉(zhuǎn)移的條件,從而使得腫瘤得到進展。越來越多的證據(jù)表明,腫瘤微環(huán)境的改變在腫瘤進展中扮演著重要的角色。在腫瘤微環(huán)境中,研究多也是主要的間質(zhì)細胞是腫瘤相關(guān)成纖維細胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)。CAFs 主要由腫瘤周邊的正常成纖維細胞和成纖維細胞樣細胞演化而來。宮頸癌組織源成纖維細胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。剛分離的宮頸癌組織源成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

產(chǎn)品名稱

人宮頸癌成纖維細胞

組織來源

宮頸癌組織

英文名稱

Human Cervical   Cancer Fibroblast Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

人宮頸癌成纖維細胞

公司實驗室分離的人宮頸癌成纖維采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的人宮頸癌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

人宮頸癌成纖維細胞

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%


人宮頸癌成纖維細胞

注意事項:

人宮頸癌成纖維細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:
人宮頸癌成纖維細胞

兔血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒

Oxidized low density lipoprotein aibody against rat (OLAb) ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)檢測試劑盒

HumanLeishimariaaibodyELISAKit 人利什曼原蟲抗體(LeishimariaAb)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanFreeTestoterone,F-TESTO檢測試劑盒人游離睪同(F-TESTO)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織半胱蛋白酶-3(CASPASE-3)活性熒光定量檢測試劑盒20

HumanNeural-Cadherin,N-CadELISAKitN鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

CXADR重組小鼠 CXADR / CAR 蛋白 Protein

骨成型蛋白2(BMP2)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)

PDHA1重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白 (aa 30-390, His & GST 標簽) Protein

CEACAM3 Protein Human 重組人 CEACAM3 / CD66d 蛋白

TGFB2 Protein Canine 重組狗 TGFB2 / TGF-beta 2 蛋白

白介素16(IL16)重組蛋白 Recombinant Interleukin 16 (IL16)

CEACAM3 Protein Human 重組人 CEACAM3 / CD66d 蛋白

IL5重組小鼠 IL5 蛋白 Protein

TSPAN7 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白

PFDN4重組人 PFDN4 / PFD4 蛋白 Protein

小鼠A(VA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat osteonectin (ON) ELISA Kit 大鼠骨粘連蛋白(ON)檢測試劑盒

HumanCCAAT/enhancerbindingproteinalpha,C/EBPαELISAKit CCAAT增強子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenLeinizingHormone,LH檢測試劑盒雞促黃體激素(LH)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

載玻片細胞NFKAPPABP50蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

MouseFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit小鼠游離三甲狀腺原(Free-T3)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

人宮頸癌成纖維細胞小鼠胃動素(MTL)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠(Pepsin)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠胃腸癌標志物CA199檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠K1(VK1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝


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