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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

產品名稱：人大隱靜脈內皮細胞

英文名稱：Human Great Saphenous Vein Endothelial Cells

組織來源：大隱靜脈組織

產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

人大隱靜脈內皮分離自大隱靜脈；大隱靜脈起于足背靜脈弓內側端，經內踝前方，沿小腿內側緣伴隱神經上行，經股骨內側髁后方，進入大腿內側部，與股內側皮神經伴行，逐漸向前上，在恥骨結節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔，匯入股靜脈，其匯入點稱為隱股點。有5條屬支：旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內側淺靜脈和股外側淺靜脈，它們匯入大隱靜脈的形式多樣，相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結扎時，須分別結扎、切斷各屬支，以防復發(fā)。大隱靜脈內皮細胞對維持大隱靜脈動態(tài)平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統(tǒng)的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調節(jié)因子；大隱靜脈內皮細胞還釋放控制細胞增殖和調節(jié)血管壁緊張度的分子。

公司實驗室分離的人大隱靜脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的人大隱靜脈內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

兔子內皮抑素(ES)ELISA 試劑盒

People leils binding type AFP / AFP varia 1 (AFP-L1) ELISA kit E 人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)檢測試劑盒E

Humankappaimmunoglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humandynamin2,DNM2檢測試劑盒人發(fā)動蛋白2(DNM2)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織N-乙酰轉移酶(NAT)活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumanPeussioxin，PTELISAKit人百日咳毒素(PT)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

PLK1重組小鼠 PLK1 / PLK-1 蛋白 Protein

RNA結合基元蛋白20(RBM20)重組蛋白 Recombinant RNA Binding Motif Protein 20 (RBM20)

IZUMO1重組人 IZUMO1 蛋白 Protein

CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽)

IL12A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標簽)

泛素(Ub)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin (Ub)

CDK16 Protein Human 重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽)

PTPN11重組小鼠 SHP2 / PTPN11 蛋白 Protein

EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白

PRKAR1A重組人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 蛋白 Protein

小鼠胃泌素(GT)檢測試劑盒 96T/48T

Human phospholipase A2 (PL-A2) ELISA Kit 人0脂酶A2(PL-A2)檢測試劑盒

HumanAmylaseELISAKit 人(Amylase)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenIerleukin17,IL-17檢測試劑盒雞白介素17(IL-17)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞FSH-BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人大隱靜脈內皮細胞小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠纖連蛋白(FN)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用