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細胞簡介：

大鼠胰島分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島細胞作為糖尿病新藥的細胞篩選模型需保持其結構完整、生理功能穩(wěn)定和足夠長的存活時間。胰島占胰腺總質量的1%-2%，每個胰島大概含有1000個細胞。胰島移植可消除常規(guī)治療產(chǎn)生的嚴重低血糖癥狀，具有創(chuàng)傷小及并發(fā)癥少等優(yōu)點，是有前景的Ⅰ型糖尿病治療方案。移植胰島的獲得需經(jīng)過供體篩選、胰腺消化、胰島分離純化及結果鑒定等步驟，分離純化效果取決于原料及操作方法的選擇。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠胰島采用膠原酶灌注消化法結合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠胰島經(jīng)DTZ染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠可溶性瘦素受體試劑盒   小鼠可溶性瘦素受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠可溶性瘦素受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠可溶性瘦素受體試劑盒、小鼠可溶性瘦素受體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒   小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒、小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠顆粒酶試劑盒   小鼠顆粒酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠顆粒酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠顆粒酶試劑盒、小鼠顆粒酶試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠抗內膜抗體試劑盒   小鼠抗內膜抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抗內膜抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗內膜抗體試劑盒、小鼠抗內膜抗體試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1試劑盒人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseAquaporin2,AQP-2ELISAKit小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

FLRT2重組小鼠 FLRT2 蛋白 Protein

含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)重組蛋白 Recombinant Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5 (FNDC5)

CCL23重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白 Protein

CSK Protein Human 重組人 CSK / C-Src kinase 蛋白 (GST 標簽)

ANGPTL1 Protein Canine 重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標簽)

含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)重組蛋白 Recombinant Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5 (FNDC5)

CSK Protein Human 重組人 CSK / C-Src kinase 蛋白 (GST 標簽)

FLRT2重組小鼠 FLRT2 蛋白 Protein

ANGPTL1 Protein Canine 重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標簽)

CCL23重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白 Protein

大鼠胰島細胞大鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)試劑盒 ，英文名： TNFβ ELISA Kit

Mouse soluble E selectin (sE-selectin) ELISA Kit 小鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒

MouseEotaxin1ELISAKit 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforhumanImmunoglobulinE,IgEELISAKitE

微型RNA(miRNA)文庫構建技術試劑盒5次

ELISAKitM-CSF大鼠巨噬細胞集落刺激因子

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。