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細胞簡介：

大鼠卵泡膜分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu)，而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。哺乳動物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關(guān)激素的調(diào)節(jié)才能完成，垂體（卵泡刺激素和黃體生成素）使原始卵泡開始發(fā)育，其過程中還產(chǎn)生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細胞和卵泡膜細胞在垂體的作用下協(xié)同合成的，卵泡膜細胞合成的雄激素透過基膜進入顆粒細胞，并轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に?。因此，卵泡膜細胞在生殖?nèi)分泌調(diào)節(jié)中占有關(guān)鍵的位置，了解其在病理及生理中的作用，對于與性激素有關(guān)的婦產(chǎn)科疾?。ㄈ缍嗄衣殉簿C合癥、卵巢癌等）的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發(fā)育的過程中，卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以維持卵泡結(jié)構(gòu)的完整性，參與構(gòu)成卵母細胞和顆粒細胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動物中調(diào)節(jié)膜細胞類固醇激素生成的機制已見相關(guān)報道，但是有關(guān)卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠卵泡膜采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠卵泡膜經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠肝脂酶(HL)檢測試劑盒 ，英文名： HL ELISA Kit

Porcine ierleukin 4 (IL-4) ELISA Kit 豬白介素4(IL-4)檢測試劑盒

創(chuàng)傷弧菌(VV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMDC/CCL22(HumanMacrophage-DerivedChemokine)ELISAkit人巨噬細胞來源的趨化因子

體液羥脯(HYP)比色法定量檢測試劑盒20次

牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISAKit牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISAKit，牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISAKit，

IL13RA2重組大鼠 IL13RA2 / IL13R 蛋白 (Fc 標簽) Protein

Erdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10多肽 0.5mgErdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10多肽

PIN1重組人 PIN1 / Rotamase Pin1 蛋白 Protein

CCNE1 Protein Human 重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 標簽)

CLU Protein Mouse 重組小鼠 Clusterin / Apolipoprotein J / Apo-J / CLU 蛋白

Erdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10多肽 0.5mgErdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10多肽

CCNE1 Protein Human 重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 標簽)

IL13RA2重組大鼠 IL13RA2 / IL13R 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CLU Protein Mouse 重組小鼠 Clusterin / Apolipoprotein J / Apo-J / CLU 蛋白

PIN1重組人 PIN1 / Rotamase Pin1 蛋白 Protein

小鼠乙酰受體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒 96T/48T

Apoptosis of human soluble associated factor (sFAS/Apo-1) ELISA Kit 人可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)檢測試劑盒

Humaissuepolypeptidespecificaigen,TPSELISAKit 人組織多肽特異性抗原(TPS)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor5-HT(Mouse5-Hydroxyyptamine)ELISAKit小鼠5羥色胺

飲料氨含量光譜法定量檢測試劑盒20次

MouseMacrophageInflammatoryProtein1β,MIP-1βELISAKit小鼠巨噬細胞性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠卵泡膜細胞表達趨化因子 (TECK)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

基質(zhì)淋巴細胞生成素 (TSLP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

型纖溶酶原激活因子 (uPA)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

型纖溶酶原激活因子受體 (uPA-R)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。