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本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

產(chǎn)品名稱：大鼠顱蓋造骨細(xì)胞

英文名稱：Rat Calvarial Osteoblast Cells

組織來(lái)源：顱骨

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

大鼠顱蓋造骨分離自顱骨組織；造骨細(xì)胞（osteoblast）亦稱成骨細(xì)胞。是參與骨組織形成的細(xì)胞。顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié)，起著保護(hù)和支持腦、感覺(jué)器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內(nèi)有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu)，構(gòu)成面部的支架，共15塊。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。骨不斷地進(jìn)行著重建，骨重建過(guò)程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì)，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì)，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細(xì)胞移行至被吸收部位，分泌骨基質(zhì)，骨基質(zhì)礦化而形成新骨；破骨與成骨過(guò)程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)，也是藥物篩選、生物材料開(kāi)發(fā)和生物工程研究的重要手段。

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠顱蓋造骨采用膠原酶消化法制備而來(lái)制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠顱蓋造骨經(jīng)ALP染色檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

包被條件：

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠顱蓋造骨體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的培養(yǎng)狀態(tài)。

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠印度刺猬因子(IHH)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： IHH ELISA Kit

Mouse immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白A(IgA)檢測(cè)試劑盒

MouseOsteoprotegerin,OPGELISAKIT 小鼠骨保護(hù)素(OPG)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanElastaseELISAKit人彈性蛋白酶

細(xì)胞3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性直接比色法定量檢測(cè)試劑盒20/50次

ELISAKitcAMP大鼠環(huán)0酸腺苷

HGF重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein

干擾素α(IFNα)重組蛋白 Recombinant Interferon Alpha (IFNa)

WARS重組人 WARS / TrpRS 蛋白 Protein

FABP1 Protein Human 重組人 L-FABP / FABP1 蛋白

FCGR2A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

干擾素α(IFNα)重組蛋白 Recombinant Interferon Alpha (IFNa)

FABP1 Protein Human 重組人 L-FABP / FABP1 蛋白

HGF重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

WARS重組人 WARS / TrpRS 蛋白 Protein

小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human nephrin (nephrin) ELISA Kit 人蛋白(nephrin)檢測(cè)試劑盒

humahyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit 人抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humanai-nucleosomeaibodyIgG,AnuA-IgG檢測(cè)試劑盒人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物銅ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量檢測(cè)試劑盒20次

HumanUbiquitin,UbELISAKit人泛素蛋白(Ub)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠顱蓋造骨細(xì)胞小鼠β-防御素(β-DF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(sNP/Sm)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無(wú)用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開(kāi)，使細(xì)胞解離出來(lái)。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。