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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Mouse IGF-1 protein

產(chǎn)品中文名稱：重組小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子-I（IGF-I)

規(guī)格：20 μg/500 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8695
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

標(biāo)簽:無(wú)標(biāo)簽

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:小鼠

序列:氨基酸序列來(lái)源于小鼠源：IGF-1 (P05017) (Gly49-Ala118)表達(dá)的蛋白片段，C-末端帶有 6×His 標(biāo)記。

活性:通過(guò)其誘導(dǎo)MCF-7 細(xì)胞增殖的能力來(lái)衡量。這種效應(yīng)的ED50<2納克/毫升。重組小鼠 IGF-I 的比活力大于5 x 10? IU/mg。

蛋白長(zhǎng)度：該蛋白質(zhì)的計(jì)算分子量為 8.61 kDa，在還原條件下，蛋白質(zhì)遷移為 11-17 kDa（SDS-PAGE 分析）。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

采動(dòng)?動(dòng)

背景

胰島素樣生長(zhǎng)因子 1（IGF-I）是一種 7.81 kDa 的胰島素樣生長(zhǎng)因子，有 71 個(gè)氨基酸殘基。IGF-I 主要在肝臟、脂肪組織、宮頸、子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞、白細(xì)胞中表達(dá)，也可從血漿中分離出來(lái)。IGF-I 是垂體生長(zhǎng)激素促進(jìn)蛋白質(zhì)合成代謝作用的媒介。IGF-I 還通過(guò)與 IGF-I 受體結(jié)合影響糖原代謝、DNA 合成和葡萄糖攝取。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease 0.5mgCAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶(抗原)

FST Protein Human 重組人 Follistatin / FST 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GRN重組小鼠 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 Protein

IL21 Protein Rat 重組大鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白

NELL2重組人 NELL2 蛋白 Protein

小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human glucocoicoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 人糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)檢測(cè)試劑盒

Humanproteolipidprotein,PLPELISAKit 人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,Bid檢測(cè)試劑盒人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物總RNA化試劑盒(高多糖/酚)20次

HumanSurfaceMembraneImmunoglobulin，SmIgELISAKit人細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

綿羊白介素2(IL-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： Aβ1-40 ELISA Kit

Mouse coicoopin releasing hormone (CRH) ELISA Kit 小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠抑瘤素mouse Oncostatin M(mouse OSM)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-1ELISAKit大鼠白介素1

通用型南瓜黃化花葉病毒(ZucchiniYellowMosaicVirus;ZYMV)試劑盒20次

ELISAKitaGT大鼠血管緊張素原

重組小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子-I（IGF-I)GRN重組小鼠 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 Protein

CAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease 0.5mgCAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶(抗原)

NELL2重組人 NELL2 蛋白 Protein

FST Protein Human 重組人 Follistatin / FST 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

IL21 Protein Rat 重組大鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白