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產(chǎn)品名稱:L929細(xì)胞,小鼠肺成纖維細(xì)胞價格

產(chǎn)品特點:L929細(xì)胞,小鼠肺成纖維細(xì)胞價格上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品:醋酸洗必泰(醋酸己定) 25g 瓶

Calcium Chloride 化鈣 500g 瓶

DL-Aspartic acid DL-天 25g 瓶

Solar Fluor 647(效果同Alexa Fluor 647)琥珀酰亞胺酯 1 mg 支

6-Aminocaproic acid 6-氨基正己酸 25g 瓶

產(chǎn)品型號:

更新日期:2021-03-29

訪問次數(shù):500

L929細(xì)胞,小鼠肺成纖維細(xì)胞價格的詳細(xì)資料:

下列是產(chǎn)品的訂購信息:

產(chǎn)品名稱

L929細(xì)胞,小鼠肺成纖維細(xì)胞價格

英文名稱

L929 cells, mouse lung fibroblasts

貨號

EY-X64126

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
1
培養(yǎng)操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

醋酸洗必泰(醋酸己定) 25g  瓶

Calcium Chloride 化鈣 500g  瓶

DL-Aspartic acid DL-天 25g  瓶

Solar Fluor 647(效果同Alexa Fluor 647)琥珀酰亞胺酯 1 mg  支

6-Aminocaproic acid 6-氨基正己酸 25g  瓶

Heparin Sepharose 6FF 肝素-瓊脂糖凝膠 6FF 25mL  瓶

Sarcosine Oxidase 肌氨酸氧化酶 1KU  瓶

Polygalacturonic acid sodium salt 多聚半糖醛酸鈉鹽 1g  瓶

Yeast Extract 酵母膏 500g  瓶

25cm2正方斜口透氣培養(yǎng)瓶 20個  包

NAD+ 氧化型輔酶Ⅰ 250mg  支

Insulin 牛胰島素 25mg  支

L929細(xì)胞,小鼠肺成纖維細(xì)胞價格蛋白磷酸酶2抗原SHP2 peptide 0.5mg

運動神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗原SIP1 peptide 0.5mg

沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗原SIRT1(sirtuin 1) 0.5mg

細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白抗原Skp2 peptide 0.5mg

協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4SLC4A4(solute carrier family 4:sodium bicarbonate cotransporter NBC1) 0.5mg

線粒體促凋亡蛋白抗原Smac/DIABLO(the second mitochondrial activator of caspase) 0.5mg

協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A7抗原Slc4a7/Nbcn1(solute carrier family 4, sodium bicarbonate cotransporter, member 7) 0.5mg

乙酰輔酶A轉(zhuǎn)運蛋白1抗原SLC33A1(Acetyl-coenzyme A transportor 1) 0.5mg

磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白抗原SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 0.5mg

運動神經(jīng)元生存蛋白1抗原SMN1(survival of motor neuron 1) 0.5mg

磷酸化Smad2抗原phospho-Smad2(p-Ser465)petide 0.5mg

細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

 

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