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小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)elisa檢測試劑盒操作步驟
點擊次數(shù):585 更新時間:2021-09-27

小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)elisa檢測試劑盒操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

人乳腺癌細胞;MDA-MB-231

人乳腺癌細胞;MDA-MB-435S

人乳腺癌細胞;MDA-MB-453

人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞;NTERA-2

人卵巢畸胎瘤細胞;PA-1

人胰腺癌細胞;PANC-1

人成骨肉瘤細胞;Saos-2

人神經(jīng)母細胞瘤細胞;SH-SY5Y

人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3

人骨肉瘤細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]

人橫紋肌肉瘤細胞;A-204

人肺腺癌細胞;Calu-3

人腎癌Wilms細胞;G401

人肝癌細胞;Hep G2 [HepG2]

人急性早幼粒白血病細胞;HL-60

人骨肉瘤細胞;HOS

人慢性髓系白血病細胞;K562

人前列腺癌細胞;LNCaP

人乳腺癌細胞;MCF 7B

人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4

人小細胞肺癌細胞;NCI-H209

黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI

人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS

人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)

人腦瘤細胞;SF126

人腦瘤細胞;SF763

人腦瘤細胞;SF767

人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1

人腎上腺皮質(zhì)癌細胞;SW-13

人結(jié)直腸癌細胞;T84

人急性單核細胞白血病細胞;THP-1

人神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤細胞;U251

人組織細胞淋巴瘤細胞;U937 [U-937]

人胃腺癌細胞;BGC-823

人低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82]

人喉癌上皮細胞;Hep-2

人纖維肉瘤細胞;HT-1080

人絨癌細胞;JEG-3

人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16

白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2

TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3-VP16-TNFa

人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1

人神經(jīng)母細胞瘤細胞;BE(2)-M17

人乳腺癌細胞;MDA-MB-157

人成骨肉瘤細胞;MG-63

人小細胞肺癌細胞;NCI-H446

人多發(fā)性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]


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