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驢血清保存的注意事項(xiàng)以下幾點(diǎn):
(1)需要保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月.由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?
(2)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀.
(3)熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量.補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺, 增強(qiáng)吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化.
(4)血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點(diǎn)":經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染.一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號(hào)的血清.
(5)一般提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清.
大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞
人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞
HUVEC, 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞名稱
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)
人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪
人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝
人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶
細(xì)胞名稱
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞
小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
人腦血管平滑肌細(xì)胞
人海馬神經(jīng)元
人少突膠質(zhì)細(xì)胞
人星形膠質(zhì)細(xì)胞
細(xì)胞名稱
小鼠成纖維細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞
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